Situs aktif merupakan bagian dari struktur tersier enzim yang berfungsi sebagai lokasi aktivitas katalisis. Bagian ini biasanya berukuran 10%-20% dari total volume enzim.[1] Biasanya, bagian ini terdiri dari tiga hingga empat asam amino dan asam amino lain pada enzim berfungsi untuk mempertahankan struktur enzim tersebut.[2] Pada beberapa enzim, situs aktif terletak di dalam inti protein dan untuk mencapainya, substrat harus melewati tubuh bagian luar protein melalui sebuah area seperti terowongan. Mayoritas terowongan ini berfungsi sebagai saringan dan juga memengaruhi spesifisitas substrat serta mekanisme katalitik enzim tersebut.[3]