Homofobi avser negativa attityder, fientlighet och känslor mot homosexualitet, homosexuella, HBTQ-kultur och personer som identifierats eller antas vara homosexuella kvinnor och män, bisexuella eller transpersoner. Uttrycken kan vara antipati, förakt, fördomar, förlöjligande, aversion och hat. Känslorna kan vara baserade på irrationell eller rationell rädsla, irrationell eller rationell obehags- eller äckelkänsla, politisk övertygelse eller religiös tro.[1][2][3][4][5][6] Homofobi återfinns i allvarliga och fientliga beteenden som diskriminering och våld mot HBTQ-personer (se hatbrott), som sker på grund av en icke-heterosexuell sexuell läggning.[1][2]
I en del sammanhang betecknar homofobi både en enskild individs negativa attityder och samhällets generellt negativa attityder gentemot företeelserna. I andra sammanhang håller man isär detta och låter ordet homofobi beteckna enbart en individs enskilda attityd, medan samhällets generella negativa attityd, dess strukturella förtryck, betecknas som heterosexism.
Ordet noterades första gången i engelskan, 1969, och blev senare ett översättningslån i svenskan. I franskan användes ordet första gången på detta vis 1977.